کلاسیکی سوائن بخار وائرس اینٹی باڈی ایلیسا کٹ

تفصیلات

 

 

ٹیسٹ کے طریقہ کار اور تشریح

 

مرحلہ 1 ٹیسٹ کا طریقہ کار

1.1 حل کی تیاری

Working حراستی wایشنگ مائع:استعمال سے پہلے ، واش حل کو کمرے کے درجہ حرارت (20-25 ڈگری) پر بحال کیا جانا چاہئے اور اسے یکساں بنانے کے لئے یکساں طور پر ہلا دینا چاہئے۔ اس کے بعد 20 بار صاف پانی کے ساتھ متمرکز واش حل (مثال کے طور پر ، 5 ملی لٹر میں دھونے کا حل 95 ملی لیٹر صاف پانی میں شامل کیا جاتا ہے) ، اچھی طرح مکس کریں ، اور کمزور دھونے والے مائع کو 7 دن کے لئے 2-8 ڈگری پر محفوظ کیا جاسکتا ہے۔

1.2 نمونہ کی تیاری

① جانوروں کا سارا خون لیا گیا ، 10 منٹ کے لئے 4000rpm پر سینٹرفیوج کیا گیا ، اور سپرنٹنٹنٹ جمع کیا گیا۔ سیرم کو ہیمولیسس کے بغیر قدرتی طور پر بھی جمایا جاسکتا ہے۔

Ser سیرم کمزور پلیٹ میں 10 بار ٹیسٹ کرنے کے لئے سیرم کو کمزور کریں (مثال کے طور پر: 135UL نمونہ ڈیلیوینٹ میں تجربہ کرنے کے لئے سیرم کے 15ul شامل کریں)۔

نوٹ: منفی اور مثبت کنٹرولوں کو گھٹا دینے کی ضرورت نہیں ہے۔

1.3 ٹیسٹ کا طریقہ کار

ینجائم لیبل مائکروپلیٹ کو لے لو (نمونوں کی تعداد کے مطابق ، بے دخل اور کئی بار استعمال کیا جاسکتا ہے) ، انزائم لیبل مائکروپلیٹ میں 100ulled سیرم کا 100ul شامل کریں ، منفی کنٹرول اور مثبت کنٹرول کے لئے ہر ایک کو دو کوں کو مرتب کریں ، اور 100ul کو اس میں شامل کریں۔ بالترتیب رد عمل۔ پلیٹ کو ڈھانپنے کے لئے سگ ماہی پلیٹ فلم کا استعمال کرتے ہوئے ، اور 30 ​​منٹ کے لئے 37 ڈگری پر انکیوبیٹ کریں۔

cail سگ ماہی پلیٹ فلم کو کھولیں ، پلیٹ میں حل کو اچھی طرح سے ہلا دیں ، ہر کنویں میں 300µL کام کرنے والے حراستی واشنگ مائع شامل کریں ، اور پھر کنویں میں مائع کو ضائع کردیں۔ مذکورہ بالا اقدامات کو 5 بار دہرائیں ، اور آخر میں صاف جاذب کاغذ پر خشک ہوں۔

ہر ایک کنویں کے لئے انزائم کا 100µl ، پلیٹ کو ڈھانپیں ، اور 30 ​​منٹ کے لئے 37 ڈگری پر انکیوبیٹ کریں۔

cail سگ ماہی پلیٹ فلم کو کھولیں ، پلیٹ میں اچھی طرح سے حل ہلا دیں ، ہر کنویں میں 300µl کام کرنے والے حراستی دھونے مائع کو شامل کریں ، اور پھر کنویں میں مائع کو ضائع کردیں۔ مذکورہ بالا اقدامات کو 5 بار دہرائیں ، اور آخر میں صاف جاذب کاغذ پر خشک ہوں۔

ہر ایک کے لئے 100µl سبسٹریٹ حل ، پلیٹ کو ڈھانپیں اور روشنی سے 37 ڈگری پر 10 منٹ تک انکیوبیٹ کریں۔

ہر ایک کے لئے 50µl حل اسٹاپ حل کریں ، اور 5 منٹ کے اندر نتیجہ کا تعین کریں۔

 

مرحلہ 2 نتیجہ کی تشریح

ہر کنویں کی OD450 قیمت 96- اچھی طرح سے مائکروپلیٹ ریڈر پر پڑھی گئی تھی۔

2.1 توثیق

منفی کنٹرول کی اوسط OD45 0 nm قدر <0. 2 تھی اور مثبت کنٹرول کی اوسط OD450Nm قدر 0.7 سے زیادہ یا اس کے برابر تھی ، تجرباتی نتائج درست تھے۔ بصورت دیگر ، ٹیسٹ کو دہرایا جانا چاہئے۔

2.2 حساب کتاب کا طریقہ

ہر نمونے کے لئے ، درست نمونے اور کنٹرول اقدار کا استعمال کرتے ہوئے S/ P کا حساب لگائیں:

2.3 نتیجہ کی تشریح

جب s/p <0. 2 ، اس کو منفی سمجھا جاتا ہے۔

جب s/p> 0. 3 ، اس کو مثبت سمجھا جاتا ہے۔

جب {{0}}. 2 سے کم یا اس کے برابر 0.3 سے کم یا اس کے برابر ہے ، تو اسے مشکوک سمجھا جاتا ہے ، اور ایک ہفتہ بعد نمونے لینے اور ٹیسٹ کو دہرانے اور ٹیسٹ کرنے کی تجویز پیش کرتا ہے۔

 

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: کلاسیکی سوائن بخار وائرس اینٹی باڈی ایلیسا کٹ ، چائنا کلاسک سوائن بخار وائرس اینٹی باڈی ایلیسا کٹ سپلائرز ، مینوفیکچررز ، فیکٹری